細胞凍存液是用于在低溫環(huán)境下保存細胞的一種特殊溶液，其主要目的是保護細胞在冷凍和解凍過程中免受損傷。細胞凍存液通常包含滲透性和非滲透性保護劑，如二甲基亞砜（DMSO）和甘油，這些成分可以滲透到細胞內(nèi)部，降低細胞內(nèi)外的電解質(zhì)濃度，防止細胞內(nèi)水分外滲，從而減少冰晶的形成。

細胞凍存液配置概述

常用的細胞凍存液配比為培養(yǎng)基：血清：DMSO=7:2:1，適用于多數(shù)細胞系，能夠保證細胞在凍存過程中有較高的存活率。需要長時間保存或者具有特別珍貴性的細胞系調(diào)整為血清：DMSO的比例=9:1，這樣可以更好地保護細胞，并確保其在凍存后依然保持較好的生物學特性。

不同細胞凍存液配置比例

大部分的細胞其實并不需要20%或者90%的血清，只需用含有10%血清的培養(yǎng)基來配置成含5%DMSO的溶液即可用于細胞凍存，有的甚至都不需要加血清。

凍存液配置的一些注意事項

? 選擇合適的細胞狀態(tài)：應(yīng)選擇處于對數(shù)生長期且細胞匯合度在80%-90%左右的細胞進行凍存操作，以確保細胞在最佳狀態(tài)下進行凍存。

? 細胞密度：凍存時的細胞密度應(yīng)適當，推薦密度為3×10^6到1×10^7細胞/mL。細胞密度過低可能會影響存活率。

? 避免長時間暴露于常溫：細胞懸液加入凍存液后應(yīng)盡量減少在常溫下的放置時間，DMSO在常溫下對細胞有較大的損傷。

? 使用高質(zhì)量的凍存管：確保使用無菌、耐低溫的凍存管，并在分裝時做好標記，以便后續(xù)識別。

? 血清和DMSO的比例：常用的比例為90%血清+10%DMSO或55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%血清+5%DMSO，根據(jù)具體細胞類型和實驗需求進行調(diào)整。